肺炎支原体（Mycoplasma pneumonia, MP）是儿童呼吸道感染的主要病原之一，社区获得性肺炎中约 40% 左右由 MP 引起，其中约 18% 需要住院治疗。近年来，难治性的支原体肺炎（refractory Mycoplasma pneumonia pneumonia, RMPP）发病率在我国有逐年升高趋势，但目前临床尚缺乏行之有效的预测方法。因此，发现、补充和不断完善新型预后标志物是提高 RMPP 预警有效性和准确性的重要保证，是 RMPP 诊治的突破。

2019 年 08 月，苏州大学附属儿童医院陈正荣团队在《分子医学杂志》发布研究成果，目的旨在探寻能预测 RMPP 患儿的生物标志物，并通过体外和在体内实验明确了支原体来源的社区获得性呼吸窘迫（Community-acquired respiratory distress syndrome toxin, CARDS）毒素的具体生物学功能。

研究自 2015 年 1 月至 2016 年 6 月纳入 71 例经血清 ELISA 和鼻咽分泌物 PCR 确诊的支原体肺炎（Mycoplasma pneumoniae pneumonia, MPP）患儿，并以 22 例急性支气管炎异物患儿为对照，检测 BALF 中 CARDS 毒素以及系列炎症因子的表达，并通过 ROC 曲线明确上述指标的诊断价值。同时，在体内外利用小鼠巨噬细胞系（RAW264.7）和 TNF-α^-/-敲基因小鼠来验证 CARDS 毒素的生物学功能是否与 TNF-α过表达有关。

研究发现与非难治性支原体肺炎患儿相比，RMPP 患儿 BALF 中 CARDS 毒素、TNF-α以及 IL-6 较对照组显著升高（P < 0.05）（表 1）。且患者 BALF 中 TNF-α水平呈正相关，但与 IL-6 呈负相关（图 1）。利用患儿 CARDS 毒素、TNF-α与 IL-6 进行 RMPP 预测，经过受试者工作曲线下面积比较后发现，BALF 中 TNF-α的水平可以作为预测 RMPP 的有效指标，曲线下面积为 0.824，约登指数为 0.692，优于 CARDS 毒素和 IL-6 的预测结果。

表 1. 对照组、非难治性支原体肺炎、难治性支原体肺炎患儿肺泡灌洗液 CARDS 及细胞因子水平

图 1. 支原体肺炎患儿肺泡灌洗液 CARDS 毒素与 TNF-α和 IL-6 关系

体外研究发现，CARDS 毒素可使上皮细胞空泡化（图 2）。利用 CARDS 毒素刺激小鼠巨噬细胞系 RAW264.7，发现 CARDS 毒素可以诱导小鼠巨噬细胞分泌 TNF-α。体内研究证实，与对照组接受 PBS 相比，野生型小鼠接受 CARDS 毒素后出现明显的支气管官腔狭窄以及气管、血管束周围大量炎性细胞浸润（图 3）。与野生型小鼠相比，TNF-α-/-敲基因小鼠经鼻腔气道滴入 CARDS 毒素其肺部炎症细胞浸润以及粘液分泌显著减轻（图 3）。

图 2. CARDS 毒素可引起 Hella 细胞空泡化

图 3.PBS 对照组、野生型小鼠滴入 CARDS 毒素、TNF-α^-/-敲基因小鼠滴入 CARDS 毒素肺组织染色

本研究显示 MPP 患儿 BALF 中 CARDS 毒素和 TNF-α呈高表达，CARDS 毒素可以诱导巨噬细胞分泌 TNF-α，且 CARDS 毒素和 TNF-α可以作为预测 RMPP 的有效生物标志物。

原文：Li G, Fan L, Wang Y et al. High co-expression of TNF-α and CARDS toxin is a good predictor for refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Mol Med. 2019;25(1):38.

审编：周飞 中日友好医院呼吸与危重症医学科二部

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